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贝伐单抗生物分析的高灵敏度ELISA技术

导读这篇新发表的文章探索了一种新的酶联免疫吸附测定(ELISA)的开发和验证,该酶联免疫吸附测定对贝伐单抗(BEV)进行生物分析具有高灵敏度和选择

这篇新发表的文章探索了一种新的酶联免疫吸附测定(ELISA)的开发和验证,该酶联免疫吸附测定对贝伐单抗(BEV)进行生物分析具有高灵敏度和选择性,贝伐单抗(BEV)是用于不同类型癌症免疫疗法的单克隆抗体。BEV被特异性的特异性抗原人血管内皮生长因子蛋白捕获。(VEGF)固定在96孔测定板上。

使用辣根过氧化物酶标记的抗人IgG(HRP-IgG)和3,3`,5,5`-四甲基联苯胺(TMB)作为过氧化物酶的生色底物来定量形成在板孔上的BEV-VEGF复合物。建立进行建议的ELISA的最佳条件,并根据用于治疗性单克隆抗体生物分析的免疫测定方法验证的指南评估其分析性能。测定的检测极限为1.01 ng / mL,有效工作动态范围为3.07-100 ng / mL。

证明了测定的准确性和准确性。具有高通量分析功能的本测定非常容易在96孔板中进行,并允许操作员一式三份地分析一批〜200个样品。这有助于在临床环境中处理大量样品。ELISA消除了通过亲和层析或其他复杂设备对血浆样品进行预处理的需要。提议的ELISA是估算BEV纳克水平的有用而强大的方法。它已被广泛应用于生命科学研究应用中。

ELISA的基本原理是使用一种酶来检测抗原(Ag)抗体(Ab)复合物的结合。该酶将无色底物(色原)转化为有色产物,表明存在Ag:Ab复合物结合形成,从而避免了使用放射性同位素产生辐射的危险。预计用于BEV的拟议ELISA将有助于研究其PK,PD,TDM,并评估生物类似物或生物制剂的预期生物利用度。

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